مقدمه مطالعات و تحلیل های آینده نگر در دنیای داروسازی به ما نشان داده اند که سموم بعضی از حشرات و خزندگان می توانند راهکارهای نوینی در راستای تهیه دارو و پژوهش در حوزه تشخیص و درمان سرطان ارايه دهند. با توجه به اینکه IL-12 دارای خواص ضد رگزایی و توانایی تغییر در پاسخ های ایمنی (Immunomodulating) می باشد، از این سایتوکاین به عنوان یک گزینه مناسب جهت دفاع علیه سرطان یاد می شود. در کنار خواص ضد توموری، ضد متاستاتیک و ضد ویروسی این سایتوکاین از آن به عنوان ادجوانت در واکسن ها نیز استفاده می شود. هدف از این مطالعه بررسی ظرفیت و توانایی ونوم عقرب همی اسکورپیوس لپتوروس (گادیم) در القاء بیان و تولید سایتوکاین IL-12 در منوسیت های جداشده از خون محیطی انسان بود. روش کار اندازه گیری سایتوتوکسیسیتی سم با استفاده از روش LDH، بررسی میزان بیان mRNA ژن IL-12 p40 بوسیله Real-time PCR و میزان تولید و آزادسازیIL-12 با استفاده از تکنیک الیزای ساندویچ بود. برای این منظور منوسیت های جدا شده از خون انسان (cells/ml3000000-250000)در برابرغلظت های مختلفی از ونوم ( µg/ml20و10 ،5 ،5/2 ،25/1 ،625/0)در پلیت های 96 تایی قرار داده شد و در زمان های انکوباسیون های متفاوت (hr24، 12، 6)بیان و تولید پروتئین IL-12 را بررسی شد. یافته ها داده های این تحقیق به ما نشان داد که سایتو توکسیک بودن این ونوم وابستگی مستقیمی به افزایش غلظت ونوم و مدت زمان انکوباسیون دارد. به طور واضحی در این مطالعه مشاهده شد که بالاترین میزان در افزایش بیان و تولید IL-12 در پایین ترین غلظت ونوم(625/0 ماکروگرم در میلی لیتر) و بعد از 6 ساعت انکوباسیون رخ می دهد. نتیجه گیری این یافته ها نشان داد که ونوم عقرب همی اسکورپیوس لپتوروس حاوی ترکیبات فعالی است که می تواند به صورت مستقیم سیستم ایمنی را برای تولید IL-12 تحریک کند.
Introduction The objective of this study was to evaluate the capacity of the venom from Hemiscorpius lepturus to induce expression and production of interleukin-12 (IL-12) on isolated human monocytes. Material and Methods For this purpose, isolated human monocytes (250,000-300,000 cells/ml) were exposed to different concentrations of the venom (0.625, 1.25, 2.5, 5, 10 and 20 mg/ml) in 96-well plates for varying incubation periods (6, 12, and 24 h). The end point of assessment included LDH cytotoxicity assay, measurement of expression of IL-12,p40 mRNA by real-time PCR, and quantification of IL-12 release using sandwich ELISA technique. Results The results showed that this venom produced concentration- and time of incubation dependent cytotoxicity. The level of enhancement of expression and production of IL-12 were found significantly higher with lowest concentration and after 6 h of incubation. Discussion The findings demonstrated that the venom from this scorpion contains active constituents which can direct the immune system to produce IL-12.