زمینه و هدف: لیشمانیوز، بیماری عفونی انگلی با انتشار وسیع در مناطق معتدله و گرمسیری است. با توجه به اینکه ارتقاء روش های تشخیص صحیح و سریع CL (Cutaneous Leishmaniasis) نقش به سزایی در کاهش عوارض بیماری به خصوص پیشگیری از بروز اسکارهای وسیع دارد ، هدف از این مطالعه ارزیابی روش PCR-RFLP با پرایمرهای ITSRL و L5.8S در مقایسه با روش های مستقیم میکروسکوپی و کشت NNN برای تشخیص CL می باشد. مواد و روشکار: در این مطالعه از بین افراد دارای ضایعه ی جلدی مشکوک به CL ،60 بیمار با Leishmanin Skin Test (LST) مثبت انتخاب و از هر کدام سه نمونه جهت بررسی میکروسکوپی، کشت در محیط NNN و PCR–RFLP تهیه گردید. لامهاي رنگآميزي شده با لنز روغني×100 جهت مشاهده اشکال اماستیگوت انگل آزمايش شد. جهت كشت مقداري از مواد برداشت شده از حاشیه ضایعه بیمار به محیط NNN ، انت قال داده شد. پس از استخراج DNA با استفاده از رو ش PCR-RFLP تکثیر از توالی ITS1 با پرایمرهای اختصاصی صورت گرفت و بعد از هضم با آنزیم HaeIII ایزولهها درمقایسه با سویههای استاندارد تعیین گونه شد. داده ها با استفاده از آمار توصیفی و تست حساسیت با استفاده از نرم افزار SPSS15 مورد تجزیه وتحلیل قرار گرفت. یافتهها: روش ميکروسکوپي در 36 مورد از 60 بيمار (%60) و نتايج کشت نمونه ها در محيط NNN در 37 مورد (%62) مثبت شد. در روش PCR - RFLP 55 مورد (%9 1 )، با این روش مثبت و تعیین گونه شد. نتیجه گیری: با توجه به نتایج حاصل از این مطالعه و امکان تشخیص گونه ها با روش PCR-RFLP ، فراهم نمودن امکانات استفاده از این تکنیک، همراه با روش مستقیم میکروسکوپی و کشت NNN در موارد لازم، در مراکز درمانی پیشنهاد می گردد. وا ژ ه های کليدي: PCR-RFLP ، مستقیم میکروسکوپی، کشت، لیشمانیوز جلدی