.............................................................................................................................................. 13 1. INTRODUÇÃO.................................................................................................................................. 14 1.1. Sporothrix schenckii ........................................................................................................................ 14 1.2. Esporotricose ................................................................................................................................... 16 1.3. Resposta imune frente ao Sporothrix schenckii ............................................................................... 18 1.4. Receptores que participam no reconhecimento de patógenos ......................................................... 21 2. OBJETIVOS ........................................................................................................................................... 24 3. MATERIAIS E MÉTODOS .................................................................................................................. 25 3.1. Delineamento experimental ............................................................................................................. 25 3.2. Modelo experimental ....................................................................................................................... 25 3.3. Microrganismo e condições de crescimento .................................................................................... 26 3.4. Infecção dos animais ....................................................................................................................... 26 3.5. Avaliação da carga fúngica ............................................................................................................. 26 3.6. Preparação do fungo S. schenckii termo-inativado (SSTI) .............................................................. 27 3.7. Reversão do fungo S. schenckii para extração do antígeno fúngico ................................................ 27 3.8. Extração dos antígeno fúngicoFração Álcali-Insolúvel (F1) do fungo S. schenckii ..................... 27 3.9. Obtenção do exsudato peritoneal .................................................................................................... 28 3.10. Avaliação da viabilidade celular de macrófagos ........................................................................... 28 3.11. Obtenção do sobrenadante de macrófagos .................................................................................... 29 3.12. Análise de fagocitose por macrófagos ........................................................................................... 29 3.13. Produção de H2O2 .......................................................................................................................... 30 3.14. Determinação da produção de óxido nítrico .................................................................................. 30 3.15. Determinação das citocinas ........................................................................................................... 31 3.16. Determinação da expressão de Dectina-1 ...................................................................................... 32 3.17. Análise dos resultados. .................................................................................................................. 32